抗人IgG單克隆抗體RM 8671是一種在鼠懸浮培養(yǎng)中表達的重組人源化 IgG1κ，并經過生物制藥行業(yè)標準的上游和下游純化，以去除工藝相關的雜質。它是通過鏈間和鏈內二硫鍵連接的兩條輕鏈和兩條重鏈亞基的約 150 kDa 同源二聚體。抗人IgG單克隆抗體RM 8671分子具有高豐度的 N 末端焦谷氨酰胺化、C 末端賴氨酸剪切和重鏈糖基化。該蛋白質還具有低豐度的翻譯后修飾，包括蛋氨酸氧化、脫酰胺和糖化 [1-4]。
抗人IgG單克隆抗體RM 8671完整分子量分析
質譜電噴霧離子化源( ESI)可以使完整抗體蛋白帶多個電荷，從而將質荷比(m/z)降至質譜儀可監(jiān)測的范圍內。而對帶多電荷的蛋白質譜譜圖進行去卷積處理是完整蛋白質分子量測定的首選方法，其與高分辨率質譜儀一起使用時，可區(qū)分抗人IgG單克隆抗體糖型與其它翻譯后修飾(PTM)。在進入質譜儀之前，色譜分離可用于提高基于MS的完整檢測的通量和靈敏度。反相高效液相色譜(RP - HPLC)和尺寸排阻色譜(SEC)都已成功用于完整的mAb分離檢測[;]。本研究將上述方法應用于抗體對照品的分析中，并將實測的分子量與理論分子量進行比較。
mAb的完整分子量解析如表1及圖1所示。圖1A顯示，抗人IgG單克隆抗體完整蛋白所帶電荷狀態(tài)良好。綜合表1和圖1B可知，mAb的主峰(4號峰)是重鏈上攜帶的兩個COF;部分重鏈(5號峰)含有COF/G1F,相對比例為18.3%;小部分抗體兩條重鏈(6號峰)攜帶GIF糖型，其比例為3.1%。相對比例為6.9%的重鏈(2號峰)攜帶COF/COF(COF掉一個HexNAc)，極少部分(1.4%)重鏈(1號峰)攜帶的COF/COF掉2個HexNAc。可見此抗體的主要糖型是GOF與GIF。3號峰未解析出，從圖1B插圖可得，其匹配的是主峰的部分，即此峰為主峰的一部分，此現(xiàn)象可能是去卷積ReSpect算法導致的。
東莞市百順生物科技有限公司是NIST的代理商，專業(yè)代理NIST 抗人IgG單克隆抗體RM 8671 標準品。
陳經理（銷售）
